Le principe
de fonctionnement d'un cytomètre de flux
Le cytomètre de flux comprend trois parties:
- Un réseau fluidique constitué
d'une veine liquide s'écoulant à vitesse constante qui
entraîne et focalise un deuxième flux liquide contenant
l'échantillon;
- un banc optique avec une ou plusieurs
sources lumineuses et ses détecteurs du type photodiode (pour
la diffusion de la lumière) et des photomultiplicateurs et filtres
optiques qui permettent de quantifier les diverses fluorescences émises
par chaque objet,
- un microprocesseur qui convertit les
signanux électriques en siganux numériques , coordonne
les données , prépare les représentations graphiques
et les analyses statistiques.
certains appareil comprennent un dispositif de tri.
En polarisant brièvempent le jet , on obtient des gouttelettes
chargés (+ ou -) qui seront déviées, avec leurs contenus,
dans un champ electromagnétique.
la cytométrie en flux permet l'analyse de
nombreux constituants cellulaires (acides nucléiques, lipides,
protéines...), d'organites isolés (noyaux, motichondries,
plastes, chromosomes...) ou de certaines fonctions cellulaires (viabilité,
activités enzymatiques, gènes rapporteurs, pH, potentiels,
activités ioniques...). typiquement l'analyse se fait à
plusieurs milliers d'objets par seconde.
(d'après olivier CLATRICE et Spencer
BROWN, ISV, CNRS, Gif sur Yvette)
|